去年 12 月，英国伦敦大学学院（UCL）和大奥蒙德街医院（GOSH）Waseem Qasim 团队公布了一项通用型细胞治疗临床试验重要进展，即碱基编辑通用型 CAR-T 疗法成功治疗一名 13 岁白血病患儿。
近日，该团队更新了临床试验的最新进展，相关的临床试验数据发表在 The New England Journal of Medicine 上。在试验中，三名患有复发性 T 细胞白血病的青少年患儿已经接受了基于碱基编辑的通用型 CAR-T 细胞治疗，初步显示出了一定的治疗效果，但是也存在一定风险。
论文中提到，第一位年轻患者是一名 13 岁的女孩，接受细胞治疗后病情得以缓解，后续进行了骨髓移植，六个月后已检测不到癌细胞；第二名受试患者是一名 13 岁的男孩，他在接受 CAR-T 治疗几周内发生了真菌感染，治疗一个月后死亡；第三名受试患者是一名 15 岁的男孩，他接受治疗后出现了巨细胞病毒（CMV）的局部感染，不过后续治疗效果良好，并接受了干细胞移植。
官方新闻稿中提到，患者接受的治疗是一款多重碱基编辑的通用型 CAR-T 细胞疗法，称之为 BE CAR7-T 细胞治疗，由 Waseem Qasim 教授团队设计和开发。
论文中提到，临床 I 期研究的中期结果将进一步支持对复发性白血病患者进行碱基编辑 T 细胞的研究，也指出免疫治疗过程中相关并发症的预期风险。试验中出现了严重不良事件，包括细胞因子释放综合征、多系血细胞减少症和随机性感染。
▲图 | Waseem Qasim 教授（来源：伦敦大学学院官网）
（来源：The New England Journal of Medicine）
01
3 名患儿接受治疗，1 例受试者致死
Waseem Qasim 团队正在推进 BE CAR7-T 细胞治疗的临床研究 TvT CAR7。根据官方的新闻稿，这也是全球首次基于碱基编辑的通用型细胞疗法进入人体临床研究。
这是一项开放标签、单中心、单臂和非随机临床试验，于 2022 年 4 月 14 日在伦敦大奥蒙德街医院开始。这项研究计划纳入 10 名受试者，这些患者接受细胞治疗前几乎已经用尽白血病常规治疗的所有方案。该研究旨在确定 BE-CAR7 在造血干细胞移植之前用于治疗 T-ALL 儿童患儿的安全性和可行性。
（来源：clinicaltrail）
在最新的论文中，研究团队公布了临床I期试验中 3 名青少年急性 T 淋巴细胞白血病（T-ALL）患儿接受 BE CAR7-T 细胞治疗的安全性和有效性试验数据。
第一位青少年患者是一名 13 岁的 T-ALL 患儿 Alyssa。此前，她曾接受了当前几乎所有治疗血液癌的常规方法，包括化疗和骨髓移植。然而，接受这些治疗后，该患儿病情复发，最终选择接受试验性细胞治疗。公开资料显示，她也是首个参加 BE CAR7-T 细胞治疗临床试验的受试者。
接受该疗法 28 天后，她的病情得以缓解；六个月后，第二次骨髓移植+BE-CAR7 治疗使其体内已经检测不到癌细胞。将近一年后，Alyssa 体内没有检测到癌细胞。不过，专家指出现在谈治愈还为时尚早。
（来源：上述论文）
第二位青少年患者是一名 13 岁患有皮质（cortical ）T-ALL 的男孩，且在接受维持治疗期间病情复发。接受多种治疗方法未果后，决定接受 BE CAR7-T 细胞治疗。在接受治疗的几周内，他感染了一种称为曲霉菌的真菌，这种霉菌对健康人群几乎没有什么影响，但是对免疫系统低下的人群会造成严重的感染。随后，出现持续的中性粒细胞减少症和淋巴细胞减少症状，这进一步降低了该患儿的抗感染能力。在接受 CAR-T 治疗大约一个月后（33 天），这名患儿死于与真菌感染相关的肺部并发症。
第三位青少年患者是一名患有混合表型（mixed-phenotype ）急性白血病的男孩，在接受干细胞移植和淋巴细胞输注后，出现了病情复发，后续接受了BE CAR7-T 细胞治疗。接受治疗后，患者出现了持续性的淋巴细胞减少症以及病毒再激活反应，包括巨细胞病毒（CMV）激活，患者接受了抗病毒治疗。第 28 天后，骨髓和脑脊液分析显示病情在形态学和分子学上得以缓解。一个月后再次接受治疗，后续接受了干细胞移植。
“来自同一批次的 BE CAR7-T 细胞治疗在两名患儿身上表现出了极大的治疗效果，这为后续疾病治疗提供了更多的参考。不过，试验数据也指出患者需要服用免疫抑制药物才能接受细胞疗法，有时可能会出现潜在严重的感染风险。对于这些预期风险，都应该在患者治疗前或者治疗期间提前做好规划和应急预案。”研究人员说。
新闻稿中提到，如果试验结果取得广泛成功，团队希望可以将其提供给更多的儿童，在他们病情较轻时尽早进行治疗，并计划在 2023 年进一步用于治疗其他类型的白血病。此外，如果有了充足的资金，他们还希望将来能为成年人提供服务。
根据论文中的描述，除了在英国推进的临床I期试验之外，研究团队计划在美国进行类似的临床研究，并在欧洲推进 CD33 CAR-T 细胞治疗用于干细胞移植之前复发性急性髓性白血病的研究。
02
“底层碱基编辑技术极具应用潜力”
2016 年，刘如谦研究团队首次开发出了单碱基编辑器即胞嘧啶碱基编辑器（CBE），可将 C•G 碱基对转换成 T•A 碱基对。后续，该团队不断优化和提高碱基编辑工具的安全性和有效性。这种编辑工具无需切割 DNA 双链，且对细胞的损伤程度更小，领域内相继开始基于碱基编辑工具开发“新一代”基因和细胞治疗。
Waseem Qasim 团队便是其中之一，该研究团队通过碱基编辑技术修饰 T 细胞治疗白血病，开发出了正在临床试验阶段的 BE CAR7-T 细胞治疗。上文提到，这是一款三基因敲除的通用型 CD7 CAR-T 细胞治疗，通过优化的胞嘧啶脱氨酶碱基编辑器 coBE 并将其以 mRNA 形式递送到 T 细胞中，敲除 T 细胞中的 TRBC、CD52、CD7，并为 T 细胞安装“导弹头”CAR。
▲图 | 碱基编辑 T 细胞靶向急性 T 淋巴细胞白血病（来源：上述论文）
官方资料指出，BE CAR7-T 细胞治疗敲除 TRBC 是让病人对外源 CAR-T 不产生反应；敲除表面蛋白 CD52 能够维持 T 细胞在体内长时间的表达；敲除表面蛋白 CD7 是让 CAR-T 细胞攻击表面有 CD7 的癌细胞，避免误伤体内的 T 细胞。
刘如谦在接受外媒采访时指出，“同时对 CAR-T 细胞中的三个不同链进行碱基编辑是对碱基编辑技术的一种巧妙应用，伦敦大学学院团队充分利用了碱基编辑不依赖双链断裂的优势。”
基因编辑公司齐禾生科联合创始人兼 CTO Kevin Zhao 进一步指出碱基编辑技术应用于细胞修饰的优势，“与 CRISPR 基因编辑工具相比，碱基编辑是一种更为精确的基因编辑技术，可以编辑和修改 DNA 或者 RNA 上的特定碱基，且无需剪断 DNA 双链；其次，碱基编辑对细胞损伤更小，可以最大程度降低染色质重组和 DNA 损伤等细胞危害。以编辑 T 细胞为例，CRISPR 和碱基编辑最大的不同在于，碱基编辑允许多重编辑，即在一个细胞中可以编辑多处且不会对细胞产生任何毒性。CAR-T 细胞尤其是通用型 CAR-T 细胞往往需要多位点编辑，碱基编辑技术可以保证细胞的健康状态。”
Waseem Qasim 在新闻稿中表示，“碱基编辑是通过改变 DNA 单个碱基改变或者停止基因表达，无需对染色体进行切割，这种技术对改造 T 细胞非常有效。我们的研究即是一项支持碱基编辑作为治疗方法的概念验证。”
他还提到，不限于白血病，碱基编辑技术极具应用潜力，还可用于纠正多种遗传疾病，包括镰状细胞贫血症。随着，技术的成熟并证明了安全性，碱基编辑技术可以得到相当广泛的应用。不过，仍然需要进行仔细的测试和长期的研究。
参考资料：
1.https://www.eurekalert.org/news-releases/992449
2.https://www.nejm.org/doi/full/10.1056/NEJMoa2300709?query=featured_home
